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「股票配资穿仓要还」 技术实现要素: 本发明要解决的技术问题是提供一种快速检测人所有23对染色体数目的试剂盒

发布时间:2019-07-10 13:29 来源:网络整理

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<212> DNA

本发现技能方案中,所涉及的各反复序列及其果真扩增引物如下述表1所示:

<210> 14

对付染色体数目标计较主要是按照两个相似序列间的扩增产品荧光值的比例来计较,详细如下:

<213> 人工序列

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<213> 人工序列

本发现所述的快速检测人所有23对染色体数目标试剂盒,包罗扩增检测试剂,其特征在于:所述的扩增检测引物由下述(1)-(16)所示的引物对构成:

引物SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:32用于扩增相似序列chr1-2与chrY-2,而扩增产品chr1-2与chrY-2间的相对量可以计较出1号和Y染色体的数目。

<212> DNA

<212> DNA

图1为质控品(正常男性样本)的电泳功效;个中,(a)为正常男性性染色体的电泳功效,(b)为正常男性22对常染色体的电泳功效;

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<212> DNA

<211> 21

引物SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:26用于扩增相似序列chr8-2与chr7,而扩增产品chr8-2与chr7间的相对量可以计较出8号和7号染色体的数目;

<213> 人工序列

<212> DNA

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(9)同时扩增4号染色体特异反复序列chr4-1与9号染色体特异反复序列chr9的引物对,它们的碱基序列别离如SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18所示;

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对付性染色体,当样本为正常男性标本时,4:X=2:1,Y:X=1:1,1:Y=2:1(检测功效见图1);当样本为正常女性标本时,Y=0,4:X=2:2(检测功效见图2);当样本为47,XXY样本时,4:X=2:2,Y:X=2:1,1:Y=2:1的比值干系(检测功效见图6)。

<212> DNA

<213> 人工序列

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详细实施方法

<211> 22

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连年来成长的染色体光谱核型阐明(SKY)、CGH、单核苷酸多态性微阵列(SNP-array)平分子遗传学技能实现了流产品全染色体异常的评估,但由于其检测用度昂贵以及操纵繁琐,导致该类项目很难成为一种通例的筛查项目。MLPA技能用于染色体数目标检测,大大低落了检测本钱和操纵的难度,逐渐敦促了该项目标检测。可是,其也存在着一些缺点或不敷,首先,MLPA技能需要PCR前处理惩罚,即探针毗连步调,该步调抉择了检测功效的乐成或失败,而探针毗连效率容易受DNA纯度的影响,因此,在血液或羊水的检测中往往较量不变,而在流产品组织的检测中,由于DNA纯度往往较低,导致MLPA的毗连效率不高,并最终大概发生无法判定的功效。其次,MLPA的判定较巨大,必需要有专门的软件阐明,无法获得直观的检测功效。

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5、毛细管电泳阐明:将1uL PCR产品与23uL甲酰胺和1uL分子量尺度品(Applied Biosystems)殽杂。该殽杂物在95℃下变性3分钟,并安排在冰上,以防备从头退火,直到进一步阐明。利用pop4凝胶(ABI)在ABI3130xl遗传阐明仪(Applied Biosystems)举办电泳阐明。对PCR产品举办疏散,回收GeneMapper ID软件V3.2(Applied Biosystems)举办数据阐明。别离统计SD-QF-PCR和染色体核型阐明检测功效,并举办比对阐明。

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<213> 人工序列

<212> DNA

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按下述表2配制PCR回响体系:

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